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檢測人血清、全血樣中內(nèi)臟利什曼病

廣州健侖生物科技有限公司

利什曼病是由利什曼原蟲引起的人畜共患病，可引起人類皮膚及內(nèi)臟黑熱病。臨床特征主要表現(xiàn)為長期不規(guī)則的發(fā)熱、脾臟腫大、貧血、消瘦、白細(xì)胞計(jì)數(shù)減少和血清球蛋白的增加，如不予合適的治療，患者大都在得病后1～2年內(nèi)因并發(fā)其他疾病而死亡。本病多發(fā)于地中海國家及熱帶和亞熱帶地區(qū)，以皮膚利什曼病這種形式較為常見。

檢測人血清、全血樣中內(nèi)臟利什曼病

【預(yù)期用途】

本試劑盒用于體外定性檢測人血清盒全血樣本中的黑熱?。▋?nèi)臟利什曼原蟲)病人特異性IgG抗體。內(nèi)臟利什曼蟲病或稱黑熱病，是由于內(nèi)臟杜氏利什曼原蟲團(tuán)的利什曼原蟲（杜氏利什曼原蟲）或利什曼原蟲寄生與人體巨噬細(xì)胞所引起的一種寄生病，由媒體白蛉叮咬傳播。該病在世界內(nèi)流行甚廣，包括亞、歐、非、中、南美洲的60多個(gè)國家，每年新發(fā)生的病例數(shù)約有50萬。

【檢測原理】

本試劑盒采用膠體金免疫層析技術(shù)，檢測人血清中的利什曼原蟲特異IgG抗體。本試劑盒是用利什么曼原蟲純化抗原IgG抗體分別固相于硝酸纖維金標(biāo)記得的鏈球菌G蛋白及其它的試劑制成。當(dāng)今次那個(gè)是，金標(biāo)記的鏈球菌G蛋白會(huì)與待血清的抗體結(jié)合形成復(fù)合物，若樣本中存在利什曼原蟲特異性抗體，該抗體與金標(biāo)的鏈球菌G蛋白形成的復(fù)合物由于層析作用移動(dòng)到檢測線區(qū)域時(shí)，則該復(fù)合物被固有相與檢測線區(qū)域內(nèi)的利什曼原蟲捕獲而凝聚顯色。若血樣中沒有利什么曼原蟲特異抗體，則檢測線不顯色無論樣本中是否存在利什曼原蟲特異性抗體，一條色條帶都會(huì)出現(xiàn)質(zhì)控區(qū)，作為層析過程很正常，試劑是否失效的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。

除此之外本司還有登革熱、瘧疾、寨卡、西尼羅河、黃熱病、基孔肯雅熱、萊姆、中東呼吸綜合征、鉤端螺旋體、幽門螺旋桿菌、大腸桿菌、麻疹/風(fēng)疹、腮腺炎、布魯桿菌、炭疽桿菌、巨細(xì)胞、EB病毒、狂犬病毒、腸道病毒71型等膠體金法、ELISA抗原抗體檢測試劑盒

試驗(yàn)原理：

美國 CorteZ Lishmania-Ab 試劑盒是間接法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知 LSM-Ab 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將 LSM-Ab 和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的 HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物 A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中 LSM-Ab 的濃度呈比例關(guān)系。

自備材料

蒸餾水。

加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性

避免直接接觸終止液和底物 A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項(xiàng)

試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物 A、B 液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

底物 A 應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物 B 對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD 值。

加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法。

血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g 離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g 離心 30 分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g 離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在 37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解。