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裂谷熱抗體快速檢測(cè)卡（膠體金法）

廣州健侖生物科技有限公司

裂谷熱病毒是白纖病毒科（Phenuiviridae）的一個(gè)成員，即布尼亞病毒目12個(gè)病毒科之一 ，絕大多數(shù)人間感染是與受感染動(dòng)物的血液或器官直接或間接接觸所造成的。病毒可通過(guò)宰殺、幫助接生、獸醫(yī)程序操作或處理畜體或胚胎期間處理動(dòng)物組織而傳染給人。因此，某些職業(yè)群體，如牧民、農(nóng)民、屠宰工人和獸醫(yī)，感染的風(fēng)險(xiǎn)較高。

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臺(tái)盼藍(lán)（trypan blue）是一種細(xì)胞活性染料，是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一，常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性或檢測(cè)細(xì)胞的活力?；罴?xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色，而死細(xì)胞會(huì)被染成淡藍(lán)色。臺(tái)盼藍(lán)染色后，通過(guò)顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。臺(tái)盼藍(lán)染色只需3-5分鐘即可完成，操作非常簡(jiǎn)單。

一、染色原理

正常的活細(xì)胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠阻止臺(tái)盼藍(lán)，使之不能夠進(jìn)入胞內(nèi)，細(xì)胞不被臺(tái)盼藍(lán)染色；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞，胞膜的通透性增加，臺(tái)盼藍(lán)染料可穿透細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞，與解體的DNA 結(jié)合，使其著色，從而細(xì)胞變藍(lán)。

通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。因此，借助臺(tái)盼藍(lán)染色可以非常簡(jiǎn)便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。

二、染液配制

4%臺(tái)盼藍(lán)母液：稱取4g臺(tái)盼藍(lán)，加少量蒸餾水研磨，加雙蒸水至100ml，用濾紙過(guò)濾，4度保存。使用時(shí)，用PBS稀釋至0.4%（相當(dāng)于再10倍稀釋）。

三、染色方法

制備單細(xì)胞懸液，并作適當(dāng)稀釋（106細(xì)胞/ml），取9mL細(xì)胞懸液移入試管中，加1mL 0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液，混勻。

四、結(jié)果觀察