- 產(chǎn)品描述
QIAGEN白膜層/培養(yǎng)細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒
QIAGEN白膜層/培養(yǎng)細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒FlexiGene體系可通過簡(jiǎn)單的離心操作從人全血、白膜層和培養(yǎng)細(xì)胞中分離高純度的DNA。FlexiGene DNA Kit包括緩沖液和QIAGEN蛋白酶,可直接在單管中簡(jiǎn)單的進(jìn)行純化。聯(lián)系A(chǔ)utogen, Inc.,咨詢FlexiGene試劑的自動(dòng)純化解決方案。
特點(diǎn) | 參數(shù) |
應(yīng)用 | PCR techniques, restriction digest, Southern blotting, sequencing |
洗脫體積 | 200 µl - 1000 µl |
規(guī)格 | Scalable |
主要樣本類型 | Whole blood, buffy coat, cultured cells |
處理 | Manual |
純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | Genomic DNA |
樣本量 | 100 µl - 20 ml |
技術(shù) | Single tube precipitation method |
每次運(yùn)行或制備時(shí)間 | 25 - 45 minutes (+ DNA rehydration) |
產(chǎn)量 | 35 µg / ml whole blood |
性能
使用FlexiGene體系純化的DNA可達(dá)150 kb。可用于擴(kuò)增反應(yīng)和Southern印跡實(shí)驗(yàn),也可存檔。
DNA在單管中通過離心操作,從0.1 – 20 ml(血液)、0.1 – 2 ml(白膜層)或1 – 2 x 106個(gè)細(xì)胞(培養(yǎng)細(xì)胞)中純化DNA。1小時(shí)內(nèi)處理12個(gè)樣本。依據(jù)樣本大小,再水合體積0.2 – 1 ml。
樣品 | 體積 | DNA 產(chǎn)量(µg) |
---|---|---|
血液* | 0.3 ml | 11–14 |
血液* | 2.0 ml | 75–90 |
血液* | 10.0 ml | 380–460 |
白膜層 | 0.5 ml | 110–130 |
HeLa細(xì)胞 | 106 cells | 25–35 |
原理
FlexiGene DNA體系可從不同量的全血、白膜層和培養(yǎng)細(xì)胞中純化基因組DNA。純化過程在單管中進(jìn)行,費(fèi)用少,操作簡(jiǎn)單。純化的DNA在多種下游應(yīng)用中表現(xiàn)良好。
操作流程
首先在樣本中加入裂解液。細(xì)胞核和線粒體離心沉于底部,使用包含QIAGEN Protease的變性緩沖液重新懸浮。然后蛋白裂解,加入異丙醇沉淀DNA,離心處理,70%乙醇洗滌和干燥。使用水合緩沖液重新懸浮的DNA可即用于下游分析或–20°C貯存。可從全血、白膜層和培養(yǎng)細(xì)胞中獲得高產(chǎn)量的DNA。
應(yīng)用
FlexiGene DNA Kit純化的DNA可用于多種下游應(yīng)用,包括:
- PCR
- Southern印跡
- 存檔
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