- 產(chǎn)品描述
曼氏裂頭蚴IgM抗體ELISA檢測試劑
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曼氏裂頭蚴IgM抗體ELISA檢測試劑
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【檢驗方法】
- 洗滌液配制:用蒸餾水或去離子水將濃縮洗滌液(2號液)按1:10稀釋(如取50ml濃縮液與450ml蒸餾水或去離子水),充分混勻即為工作洗滌液。
- 樣本稀釋:用樣本稀釋液(5號液)將待檢血清按1:100稀釋(如5μl血清+495μl樣本稀釋液),充分混勻。 陰性、陽性對照品不用稀釋,直接加樣。
- 加樣反應(yīng):每次試驗設(shè)陰性對照2孔、陽性及空白對照各1孔(分別加入陰性、陽性對照及樣本稀釋液100μl)。樣本檢測孔每孔加已稀釋血清樣本100μl。37℃避光反應(yīng)30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔注滿工作濃度洗滌液洗滌3次,每次均需停留1分鐘;最后一次甩凈,拍干。
- 加酶反應(yīng):除空白對照孔外,其余每孔加酶結(jié)合物(1號液)1滴,37℃避光反應(yīng)30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,如上洗滌,拍干。
- 顯色反應(yīng):加底物(3號液)和顯色劑(4號液)各1滴,混勻,37℃下避光顯色10分鐘。
- 加終止液(6號液)1滴,以空白對照調(diào)零,用酶標(biāo)儀于450nm波長(630nm作為參比波長)讀取OD值。
【參考值】
- Cut-off 值 (COV)=陰性對照平均OD值×2.1 (陰性對照孔OD值<0.07時按0.07計)。
- 有效性判定:
空白對照孔OD值<0.05(若大于0.05則實驗無效);
陰性對照孔OD值≤0.10(若大于0.10則實驗無效);
陽性對照孔OD值≥0.3(若小于0.3則實驗無效)。
【檢驗結(jié)果的解釋】
樣本OD值≥COV值時,判為曼氏裂頭蚴IgM抗體陽性