抗人CD71單抗（T9）
 

 廣州健侖生物科技?有限公司 

本司長期供應(yīng)尼古?。商鎸帲z測試劑盒，其主要品牌包括美國NovaBios、廣州健侖、廣州創(chuàng)侖等進(jìn)口產(chǎn)品，國產(chǎn)產(chǎn)品，試劑盒的實(shí)驗(yàn)方法是膠體金方法。

我司還有很多違禁品檢測、激素檢測、疫病類檢測、腫瘤標(biāo)志物檢測等抗原抗體原料，還有熒光FITC標(biāo)記類抗體、各種可標(biāo)記單抗以及免疫磁珠等等產(chǎn)品以及各種生物原料和質(zhì)控品等，。

我司還提供其它進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒：登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌、化妝品檢測、食品安全檢測等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。

抗人CD71單抗（T9）

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【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
【】    楊永漢 

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【公司地址】 廣州清華科技園創(chuàng)新基地番禺石樓鎮(zhèn)創(chuàng)啟路63號二期2幢101-3室

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(1) 10×切口平移緩沖液:  0.5M/L Tris-Cl (pH7.2)；  0.1M/L MgSO4； 10mM/L DTT；  100ug/ml BSA。

(2) 未標(biāo)記的dNTP原液：除同位素標(biāo)記的脫氧三磷酸核苷酸外,其余3種分別溶解于50mM/L Tris·Cl (pH7.5)溶液中,濃度為0.3mM/L。

(3) [α-³²P] dCTP或[α-³²P]dATP:400 Ci/mM, 10uCi/ul。

(4)E.coli DNA聚合酶Ⅰ：(4單位/ul)：溶于50ug/ml BSA, 1mM/L DTT, 50%甘油，50mM/L Tris·Cl(pH7.5)中。

(5) DNA酶:1mg/ml。

(6) EDTA :200mM/L (pH8.0)。

       (7) 10M/L NH₄Ac。

實(shí)驗(yàn)步驟

(1) 按下列配比混合:

　　　　未標(biāo)記的dNTP 10ul

　　　　10×切口平移緩沖液 5ul

　　　　待標(biāo)記的DNA 1ug

　　　　[α-32 P]dCTP或dATP(70uCi) 7ul

　　　　E.coli DNA聚合酶 4單位

　　　　DAN酶 I 1ul

　　　　加水至終體積 50ul

 (2) 置于15℃水浴60分鐘。

 (3) 加入5ul EDTA終止反應(yīng)。

    (4) 反應(yīng)液中加入醋酸銨,使終濃度為0.5M/L, 加入兩倍體積預(yù)冷無水乙醇沉淀回收DNA探針。

分子生物研究では、zuiもよく使われる針は2連鎖のDNAの針で、遺伝子の植物のコピー數(shù)の鑑定、臨床診斷などに広く適用されます。二重鎖DNAプローブの合成方法は主に以下の2種類：ニックトランスレーションとランダムプライマー合成法。
ニックトランスレーション（ニックtranslation）時の二重鎖DNA分子の1本の鎖に生じる切開時、E.coli DNAポリメラーゼⅠばヌクレオチド接続小口のさん'ヒドロキシ末端。またこの酵素を持つからご'→さん』のエキソヌクレアーゼ活性、小口からのご'端除去ヌクレオチド。切り捨てるヌクレオチドで同時に切り口のさん'端を補(bǔ)ってヌクレオチドを切り口に沿ってDNA鎖で移動、放射性のヌクレオチド無放射性の代わりにもともとヌクレオチドは、放射性同位體を混ぜ合成新鎖の中。zui適な切り口並進(jìn)斷片は普通は50-500のヌクレオチド。小口移動反応のいくつかの要因の影響を受けて：（a）制品の比活性次第「α- 32P」dNTPの比活性とテンプレートに置き換え程度ヌクレオチド。（b）DNA酵素の用量やE.coli DNAポリメラーゼⅠの品質(zhì)に影響を與える産物斷片の大きさ。（c）DNAテンプレートの抑制因子の酵素の活性を阻害するようなアガロースので、よく浄化後のDNAを使うべき。

In molecular biology research, the most commonly used probe is double stranded DNA probe, which is widely used in the identification and clinical diagnosis of transgenic plants. There are two main methods for the synthesis of double stranded DNA probes: the incision translation method and the random primer synthesis method.
The incision translational method (nick translation), when incision is generated on a chain of double stranded DNA molecules, E.coli DNA polymerase I can connect nucleotides to the 3'hydroxyl terminus of the incision. At the same time, the enzyme is from 5'to 3' exonuclease activity, can be removed from the 5'terminal nucleotide incision. Due to the cut nucleotide and at the same time the 3'end up incision incision so that the nucleotide, moving along the DNA chain, with the use of radioactive nucleotides instead of non radioactive nucleotides, radioactive isotope incorporation into new chain synthesis. The most suitable incisional translation fragment is generally 50-500 nucleotides. The incision translational reaction is influenced by several factors: the specific activity of (a) products depends on the specific activity of [alpha -32P]dNTP] and the extent of the replacement of the nucleotides in the template. (b) the dosage of DNA enzyme and the quality of E.coli DNA polymerase I affect the size of the product fragment. (c) a inhibitor in the DNA template, such as agarose, inhibits the activity of the enzyme, so a carefully purified DNA should be used.

法物研究中，zui常用之探針即為雙鐘DNA探針，其博施于轉(zhuǎn)基因物拷貝數(shù)之定、事診等者。雙鐘DNA探針之合法者有下列兩種：切口平移法和隨機(jī)引合法。
切口平移法（nick translation）當(dāng)雙鐘DNA法之一鐘上生切口時，王.coli DNA聚合酶Ⅰ則可以核苷酸接切口之三'羥基末。并當(dāng)嘻有自五→'三'之核酸外切酶活性，能自切口者五'端去核苷酸。由于遂核苷酸者又在切口之三'端補(bǔ)上核苷酸，使切口循DNA鐘動，以放射性核苷酸代本無放射性之核苷酸，將放射性同位素攙入新執(zhí)中合而為。zui宜之切口平移片段常為50-500一核苷酸。切口平移應(yīng)受數(shù)也者：（“）物之比活性在[α二32P ] dNTP之比活性與楷中核苷酸被換也。（卜人）DNA嘻之與通用.coli DNA聚合酶Ⅰ之苦傷物之大小片段。（。DNA楷中之抑制物如瓊脂糖當(dāng)抑嘻之活性，故宜用熟化后之DNA。