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諾如病毒(諾瓦克)檢測試紙

諾如病毒(諾瓦克)檢測試紙

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諾如病毒(諾瓦克)檢測試紙
為快速、多步法側(cè)流免疫層析檢測,應(yīng)用了抗諾如病毒抗原的單克隆抗體,可以快速檢測出諾如病毒。

  • 產(chǎn)品描述

諾如病毒(諾瓦克)檢測試紙  

廣州健侖生物科技有限公司

【包裝規(guī)格】

20 測試/盒

【預期用途】

諾如病毒(諾瓦克)檢測試紙   用于體外診斷。諾如病毒抗原快速檢測試劑卡(免疫層析法)是用

免疫層析的方法快速定性

測定人糞便樣本中,基因1型(GGI)和基因2型(GGII)的諾如病毒。該試劑可以協(xié)助診斷胃腸

炎,分析有疑似諾如病毒胃腸炎癥狀的兒童和成人的糞便樣本。

【檢驗原理】

  為快速、多步法側(cè)流免疫層析檢測,應(yīng)用了抗諾如病毒抗原的單克隆抗體。在加樣孔旁的反應(yīng)窗內(nèi),有兩條包被了固定抗體的平行線。檢測線(T)包含了抗諾如病毒抗原的抗體。質(zhì)控線C包含了抗鼠IgG的抗體。酶標記物1包含了生物素化的抗諾如病毒抗原的抗體,酶標記物2是由結(jié)合了辣根過氧化物酶的鏈霉菌抗生物素蛋白組成。檢測過程中,先從已經(jīng)準備好的糞便樣本懸濁液中,吸取一定量的上清液,與一定量的酶標記物1混合,加入檢測卡較小的窗口中(加樣孔)。經(jīng)過室溫下10 分鐘的孵育后,樣本和酶標記物混合液被檢測膜吸收,并在過濾片上移動。在這個過程中,諾如病毒陽性標本中的抗原-酶標記物復合物,與檢測線上固定的抗諾如病毒抗體結(jié)合,沒有結(jié)合抗原的生物素化的抗體則結(jié)合在質(zhì)控線上。之后加入酶標記物2,在室溫下孵育1 分鐘,結(jié)合了過氧化物酶的鏈霉菌抗生物素,與通過特異性抗體而固定在膜上的生物素結(jié)合。

在反應(yīng)窗加入洗液,洗掉沒有結(jié)合的過氧化物酶。如果測試為諾如病毒陽性,加入底物后三

分鐘,在檢測線(T)上就會出現(xiàn)藍線,同時質(zhì)控線(C)上也會出現(xiàn)藍線。如果質(zhì)控線沒有變藍,說明這次檢測的操作存在問題,結(jié)果不可以用于診斷。

【主要組成成分】

試劑盒內(nèi)的試劑足夠進行20次檢測

測試卡 Cassette 20次檢測 內(nèi)裝20個獨立包裝的測試卡

稀釋緩沖液 Diluent 30 ml 樣本稀釋緩沖液,氯化鈉蛋白緩沖液,含0.1% Kathon CG;

開瓶即用,藍色洗液 Wash 10ml 洗液,磷酸化的氯化鈉,含0.1% Thimerosal,開瓶即用

酶標記物1 Conjugate│1 7ml 穩(wěn)定蛋白溶液中的生物素標記的抗諾如病毒抗體,開瓶即用,

酶標記物2 Conjugate│2 5ml 穩(wěn)定蛋白溶液中的鏈霉菌過氧化物酶,開瓶即用

底物 Substrate 7ml 過氧化氫/TMB,開瓶即用吸液管 Pipet 25支 每包中裝有25支有刻度標記的一次性塑料吸樣管

【儲存條件及有效期】

4-30°C保存,必須在有效期前使用。過有效期之后,產(chǎn)品的質(zhì)量保證不再有效。同樣,如果檢測卡的外殼破損將會使檢測卡潮濕,我們將不能保證檢測卡適合使用。

有效期:6個月

【樣本要求】

糞便樣本必須使用沒有任何添加劑的干凈容器收集,試驗前儲存于溫度應(yīng)為2-8 °C。在病人癥狀出現(xiàn)后(腹瀉和嘔吐),應(yīng)盡快進行樣本采集,因為癥狀出現(xiàn)后1-3 天,病毒的清除達到zui大化。如果標本保存時間超過3 天,必須儲存于-20 °C。在實驗開始前,冷凍的樣本必須充分解凍,回復至室溫。與新鮮樣本一樣,復溫的樣本也必須在檢測前,和試劑充混合。應(yīng)避免樣本多次凍融。

采用直腸拭子采集樣本時,必須得到足夠的糞便樣本(大約100 mg)以確保檢測進行。

【檢測方法】

1.常規(guī)信息

檢測前,樣本、稀釋緩沖液、試劑和檢測卡必須恢復至室溫(20 - 25 °C)。檢測卡必須在即將使用前才可以從外包裝中取出,檢測卡一旦從外包裝中取出或被使用,則不可以再次使用。檢測不可以在陽光直射下進行。

2.準備樣本懸濁液

取1 ml樣本稀釋緩沖液Diluent 加入貼好標簽的試管內(nèi)。對于液態(tài)糞便樣本,可用盒內(nèi)的一次性吸液管Pipet 吸取100 μl樣本(至吸液管的第二個增粗處),懸空滴加于事先已加入提取緩沖液的標記試管中;對于固態(tài)糞便樣本,取50-100mg樣本(豌豆大?。┘尤刖彌_液中。樣本必須被混勻,可利用試管反復吸放,或者用漩渦混勻器將糞便懸浮液混勻。至少沉淀2分鐘后,取200- 500 μl上清液置于另一干凈試管中(或者未包被的微孔中)。

3.將檢測卡Cassette從外包裝中取出,將其放置在水平的墊子上。

4.用已經(jīng)處理過同一樣本的一次性吸管,從糞便懸濁液中吸取250 μl上清液(*個標記處),

加入干凈的、標記的試管中。

5.在試管中加入6 滴酶標記物1 Conjugate│1(滴加時保持小瓶垂直)。

6.通過吸放的方式將混合液*混勻后,用一次性吸管將其全部吸出,以緩慢平穩(wěn)連貫的水流,注入檢測卡的加樣孔中。將吸管傾斜約 45°},管口指向反應(yīng)窗,這樣混合物就可以全部流至反應(yīng)窗內(nèi)。__

7.將檢測卡在室溫下(20 - 25 °C)孵育10 分鐘。確保反應(yīng)窗的檢測膜已被樣本混合液充分浸濕,否則請將100 μl 稀釋緩沖液滴入加樣孔中。

8.在反應(yīng)窗中加入4 滴酶標記物2 Conjugate│2(滴加時保持小瓶垂直),再于室溫下孵育至少1分鐘。

9.在反應(yīng)窗中,加入10滴洗液 Wash,待洗液被*吸收后,再進行后續(xù)操作。

10.在反應(yīng)窗中加入6 滴底物 Substrate(滴加時保持小瓶垂直)。

11.之后的3分鐘內(nèi),讀出檢測結(jié)果。在3分鐘后出現(xiàn)的有色條帶,沒有診斷意義

【參考值(參考范圍)及檢驗結(jié)果的解釋】

1. 在加入底物后3 分鐘之內(nèi),在良好采光直視下讀出的檢測結(jié)果,是zui可靠的。

2. 查看在反應(yīng)窗的“C”標記處,是否有出現(xiàn)藍色的條帶(所謂的內(nèi)部質(zhì)控線),在反應(yīng)窗的“T”標記處是否出現(xiàn)藍色的條帶(所謂的檢測線)。顏色的強度可能會由淺變深。

3. 陽性結(jié)果:加入底物之后3 分鐘內(nèi),如果同時出現(xiàn)兩條藍色的條帶(檢測線“T”和質(zhì)控線“C”),可判別為陽性結(jié)果。顏色可由淺變深。如果條帶只有部分清晰出現(xiàn),也可以解釋為陽性。膜的其他顏色改變或其他部位的陰影,都不能解釋為陽性結(jié)果。

4. 陰性結(jié)果:加入底物的3 分鐘后,就可以開始判別是否為陰性結(jié)果或無效結(jié)果了。如果只在反應(yīng)窗的質(zhì)控帶“C”處出現(xiàn)藍色的條帶,在檢測帶“T”處沒有藍色條帶出現(xiàn),則可判定為陰性結(jié)果。陰性結(jié)果說明,在樣本中沒有諾如病毒的抗原存在,或抗原的量低于檢測限。

5. 無效結(jié)果:在反應(yīng)窗的檢測帶“T”和質(zhì)控帶“C”處,均無藍色條帶出現(xiàn),或者只在檢測帶

“T”出現(xiàn)條帶,這兩種情況均說明檢測無效,需要用新的檢測卡重新進行檢測。

諾如病毒抗原快速檢測卡(免疫層析法)檢測結(jié)果的解釋:

【檢驗方法的局限性】

諾如病毒抗原快速檢測試劑卡(免疫層析法)用于檢測基因1 型和基因2 型的諾如病毒,如

果病毒量沒有低于試劑的檢測限,則可以檢測該種病毒是否在糞便樣本中出現(xiàn)。糞便樣本是否取樣于胃腸炎病人的癥狀表現(xiàn)期,對結(jié)果的影響是非常重要的。檢測中出現(xiàn)藍色條帶的顏色強度,不能反應(yīng)臨床癥狀的嚴重程度,只能提示糞便樣本中的病毒抗原量。條帶的藍色可以從很淺的顏色變?yōu)楹苌畹念伾?/p>

陽性結(jié)果不能排除存在其他病原體感染。在樣本中可能同時存在兩種及以上的病原體,需要

進行鑒別的檢測以確診。雙重或多重感染的癥狀會比一種感染引起的癥狀嚴重。

陰性結(jié)果不能排除諾如病毒的存在或諾如病毒是引發(fā)胃腸炎的原因。此種情況可因以下原

因發(fā)生:間歇性病毒排出、或者糞便樣本中病毒含量過低,樣本采集時間不當,運輸或儲存條件

不適合。如果病人高度懷疑病原體感染,應(yīng)再重新留便復查。

【產(chǎn)品性能指標】

在驗證實驗中,用諾如病毒抗原快速檢測試劑卡(免疫層析法)檢測113 例糞便樣本。樣本

從胃腸炎患者的糞便中采集,既有散發(fā)病例,也有爆發(fā)病例。樣本收集于2007-2008 年的冬季,在德國漢堡的城市地區(qū)采集。在當?shù)氐男l(wèi)生研究所,用RT-PCR 的方法檢測新鮮的樣本后,將樣本凍存。2008 年7 月,將冰凍的樣本融化后,在與之前相同的實驗室,用諾如病毒抗原快速檢測試劑卡(免疫層析法)和已上市的諾如病毒抗原檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法),同時進行檢測。

【注意事項】

1. 僅用于體外診斷。

2. 實驗必須由經(jīng)過專業(yè)培訓的人員操作。必須嚴格按照醫(yī)學實驗室的規(guī)章制度操作。

3. 產(chǎn)品操作時必須嚴格按照說明書操作。

4. 樣品稀釋緩沖液中含有Kathon CG 作為防腐劑,此物質(zhì)不能接觸皮膚或粘膜。

5. 樣本和試劑不可以用嘴吸取。

6. 樣本和試劑避免接觸受傷的皮膚或者粘膜。

7. 處理樣本時應(yīng)該戴一次性手套,完成試驗后要洗手。

8. 禁止在樣本和試劑實驗區(qū)域內(nèi)吸煙、吃東西或喝水。

9. 所有試劑和材料如果接觸有潛在感染性的樣本,應(yīng)與樣本一樣,立即用適當?shù)南緞ㄈ纾?/p>

次氯酸鈉)或者高壓高溫121℃至少1 小時處理。

10. 諾如病毒抗原快速檢測試劑卡(免疫層析法)必須在效期內(nèi)使用。所有的試劑都被調(diào)整

為zui適宜的活性狀態(tài)。稀釋或改變這些試劑將減少其活性。如果不按照說明中的時

間和溫度進行操作,將會導致錯誤的結(jié)果。

11. 不同批號的諾如病毒抗原快速檢測試劑卡(免疫層析法)試劑盒中的試劑不可以混用。

12. 試劑和樣本必須避免微生物的污染,否則將會影響檢測結(jié)果。

13. 吸取每個樣本時,必須使用不同的吸管,以防止交叉污染及錯誤結(jié)果

14. 每個檢測卡只可使用一次

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