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弓形蟲IgM抗體檢測試劑盒使用說明書
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產(chǎn)品介紹
弓形蟲(Toxoplasma gondii,TO)感染人體引起弓形蟲病,常造成眼、腦的損害,感染孕婦還可能造成畸胎甚至流產(chǎn)。檢測弓形蟲抗體可輔助診斷弓形蟲的感染。
本試劑盒采用固相間接ELISA法檢測人體血清中特異性IgM抗體。
試劑及用品
1. 預(yù)包被板條48/96T; 6. 樣本稀釋液(5號液)1支;
2. 酶結(jié)合物(1號液) 1支;7. 終止液(6號液) 1支;
3. 洗滌液(2號液)1支; 8. 陽性對照血清1支;
4. 底物(3號液)1支; 9. 陰性對照血清1支;
5. 顯色液(4號液)1支;10. 使用說明書1份;
操作方法
?樣本稀釋:用樣本稀釋液(5號液)將待檢血清按1:200稀釋。陰、陽對照不用稀釋。
?加樣反應(yīng):樣本檢測孔每孔分別加已稀釋樣本血清100ul。同時(shí)設(shè)陰性、陽性及空白對照各一孔,取陰性、陽性對照各100ul分別加入反應(yīng)孔內(nèi),空白對照孔僅加入100ul樣本稀釋液(5號液)。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,每孔加洗滌液(2號液)一滴,立即用蒸餾水注滿,靜置30秒后甩去,再直接用蒸餾水洗滌四次,甩去,拍干。
?加酶反應(yīng):除空白對照孔外其余每孔加酶結(jié)合物(1號液)二滴,37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,如上洗滌,拍干。
?顯色反應(yīng):每孔加底物(3號液)和顯色劑(4號液)各一滴,混勻,37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)一滴,混勻,終止反應(yīng)(加終止液后藍(lán)色會變?yōu)辄S色)。
結(jié)果判斷
?肉眼觀察:陰性對照接近無色,陽性對照呈明顯黃色,表示實(shí)驗(yàn)有效。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性,待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。
?儀器判斷:以空白對照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm(620nm作參比波長)讀取O.D值。待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性。當(dāng)陰性對照O.D值低于0.07時(shí)按0.07計(jì)算。
注意事項(xiàng)
?試劑盒在2-8℃下保存,每次取出時(shí)先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊,各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
?洗滌時(shí)將蒸餾水加滿孔內(nèi),每次停放三十秒鐘,甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源。
?為提高實(shí)驗(yàn)的可比性建議使用儀器判讀結(jié)果,并對陰性對照測復(fù)孔以減少誤差。
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