- 產(chǎn)品描述
傳染性胸膜肺炎抗體檢測試劑盒
產(chǎn)品咨詢:
豬胸膜肺炎抗體ELISA檢測試劑盒說明
臨床意義
豬接觸傳染性胸膜肺炎是由豬胸膜肺炎放線桿菌(Porcine actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的一種以肺炎和胸膜肺炎為特征的呼吸道傳染病。原稱副豬嗜血桿菌病、豬嗜血桿菌胸膜肺炎。本病的廣泛傳播與養(yǎng)豬生產(chǎn)的集約化有著密切的關(guān)系,已成為集約化養(yǎng)豬臨床和病理上一個獨(dú)立的疾病。檢測特異性豬胸膜肺炎抗體,可作為豬場胸膜肺炎疫苗的免疫監(jiān)測及該病的輔助診斷。
本試劑盒采用豬胸膜肺炎蛋白作為固相抗原,用于檢測豬血清中抗抗豬胸膜肺炎IgG抗體。本試劑靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好,操作方便快速,可分多次使用。
試劑組成
1.預(yù)包被板1套; 6. 樣本稀釋液(5號液)1支;
2.酶結(jié)合物(1號液)1支; 7. 終止液(6號液)1支;
3.洗滌液(2號液)1支; 8. 陽性對照品1支;
4.底物(3號液)1支; 9. 陰性對照品1支;
5.顯色劑(4號液)1支; 10.使用說明書1份;
操作程序
· 樣本稀釋:用樣本稀釋液(5號液)將待檢血清按1:101稀釋,如取5ul血清與500ul樣本稀釋液充分混勻;陰、陽對照不用稀釋,直接加樣。
· 加樣反應(yīng):取出所需反應(yīng)板條,樣本檢測孔每孔分別加已稀釋樣本血清100ul。同時設(shè)陰性、陽性及空白對照各1孔,取陰性、陽性對照各100ul分別加入反應(yīng)孔內(nèi),空白對照孔僅加入100ul樣本稀釋液(5號液)。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,每孔加洗滌液(2號液)1滴,立即用蒸餾水注滿,靜置30秒后甩去,再直接用蒸餾水洗滌四次,每次均靜置30秒后甩去,zui后一次甩去拍干。
· 加酶反應(yīng):除空白對照孔外其余每孔加酶結(jié)合物(1號液)2滴,37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,如上洗滌,拍干。
· 顯色反應(yīng):加底物(3號液)和顯色劑(4號液)各1滴,混勻,37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)1滴,混勻,終止反應(yīng)(加終止液后藍(lán)色會變?yōu)辄S色)。
結(jié)果判斷
1 肉眼觀察:陰性對照接近無色,陽性對照呈明顯黃色,表示試驗(yàn)有效。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性,待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。
2 儀器判斷:以空白對照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm(620nm作參比波長)讀取O.D值,待檢孔O.D值大于陰性對2.1倍者為陽性。當(dāng)陰性對照O.D值低于0.07時按0.07計算。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒在2-8℃下保存,每次取出時先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊,各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
2.洗滌時將蒸餾水加滿各孔,每次停放三十秒鐘后甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源。
3.為提高試驗(yàn)的可比性建議使用儀器判讀結(jié)果,并對陰性對照測復(fù)孔以減少誤差。
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